В комплексе с сероорганическими соединениями



На правах рукописи


САВЕНКОВА

Мария Владимировна


ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНО-МОРФОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ПРОНИЦАЕМОСТИ КОЖИ ДЛЯ Микрочастиц ЗОЛОТА

В КОМПЛЕКСЕ С СЕРООРГАНИЧЕСКИМИ СОЕДИНЕНИЯМИ


14.03.02 – патологическая анатомия

03.03.04 – клеточная биология, гистология, цитология


Автореферат

диссертации на соискание ученой степени
кандидата мед наук


Ульяновск – 2012


Работа выполнена на кафедре В комплексе с сероорганическими соединениями анатомии человека в Федеральном муниципальном экономном образовательном учреждении высшего проф образования «Ульяновский муниципальный университет» Министерства образования и науки РФ


^ Научные руководители: доктор мед наук, доктор

Хайруллин Радик Магзинурович


доктор био наук

Терентюк Жора Сергеевич


Официальные оппоненты:

^ Савоненкова Людмила Николаевна В комплексе с сероорганическими соединениями, доктор мед наук, доктор, ФГБОУ ВПО «Ульяновский муниципальный университет», доктор

кафедры факультетской терапии

^ Ноздрин Владимир Иванович, доктор мед наук, доктор, ГУ НИИ морфологии человека РАМН, академик РАЕН, член проблемной комиссии по морфологии


^ Ведущая В комплексе с сероорганическими соединениями организация: ФГБОУ ВПО «Саратовский муниципальный мед институт им. В.И. Разумовского» Министерства здравоохранения РФ


Защита диссертации состоится 29 ноября 2012 года в 11.00 часов на заседании диссертационного совета Д 212.278.06 при Федеральном муниципальном экономном образовательном В комплексе с сероорганическими соединениями учреждении высшего проф образования «Ульяновский муниципальный университет» по адресу: г. Ульяновск, Набережная реки Свияга, 106, корп. 1, ауд. 703


С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО «Ульяновский муниципальный университет», с авторефератом – на веб-сайте http://vak.ed В комплексе с сероорганическими соединениями.gov.ru


Отзывы на автореферат просим направлять по адресу: 432017, г. Ульяновск,
ул. Л. Толстого, 42, Ульяновский муниципальный институт, Управление исследований


Автореферат разослан «____» октября 2012 г.


Учёный секретарь диссертационного совета,

кандидат мед наук, доцент М В комплексе с сероорганическими соединениями.А. Визе-Хрипунова

^ ОБЩАЯ Черта РАБОТЫ

Актуальность исследования

В последние годы пристальное внимание исследователей приковано к практическому внедрению наноразмерных материалов в биомедицинские технологии. Особенное место посреди таких материалов, используемых для исследовательских и терапевтических целей В комплексе с сероорганическими соединениями, занимают микрочастицы золота. К истинному моменту размещено существенное число работ по их использованию в разных областях экспериментальной патологии. Микрочастицы золота употребляют как носители для доставки фармацевтических веществ, генетического материала, антигенов и как В комплексе с сероорганическими соединениями лекарственное либо диагностическое средство при терапии опухолей и ревматоидного артрита, при всем этом ряд препаратов прошли клинические тесты [Abraham, 2008]. Исследовательскими работами M. Daniel и D. Astruc [2004] внушительно продемонстрирована перспективность использования золотых наноматериалов. Найдена В комплексе с сероорганическими соединениями высочайшая эффективность использования наноразмерных частиц золота в терапии злокачественных новообразований кожи и её придатков с помощью управляемой локальной гипертермии в опыте [Терентюк, 2009; 2010].

Большая часть исследователей отдают предпочтение парентеральному введению микрочастиц золота в организм В комплексе с сероорганическими соединениями животных и человека. Но при всем этом вместе с положительными, терапевтическими эффектами скопления их в кожных эпидермальных опухолевых тканях, наблюдаются и нехорошие. Скопление во внутренних органах (печени, селезенке, легких, почках), приводит к В комплексе с сероорганическими соединениями нарушению органной и тканевой микроциркуляции, развитию в их дистрофических конфигураций [Терентюк, Маслякова, Сулейманова, 2009]. Фактически не исследована трансдермальная проницаемость интактной и покоробленной кожи для золотых наноразмерных материалов, кроме используемого в косметических целях оксида В комплексе с сероорганическими соединениями титана. Интактная кожа является естественным барьером для микрочастиц. Из узнаваемых соединений, усиливающих трансдермальную диффузию, в том числе и низкомолекулярных, в текущее время более известными являются такие сероорганические соединения, как диметилсульфоксид и В комплексе с сероорганическими соединениями тиофансульфоксид. Они обеспечивают фактически секундное чрезкожное всасывание. Беря во внимание бóльшую безопасность и точность местного введения микрочастиц конкретно в ткань эпидермальной опухоли in situ, с вероятным исключением побочного эффекта скопления во внутренних органах В комплексе с сероорганическими соединениями, животрепещущим является исследование проницаемости кожи для микрочастиц золота в комплексе с соединениями, усиливающими их трансдермальную диффузию.

Истинное исследование выполнено при денежной поддержке Министерства образования и науки РФ, госконтракт № 14.740.11.1225 Федеральной мотивированной программки В комплексе с сероорганическими соединениями «Научные и научно-педагогические кадры инноваторской России» на 2009-2013 гг.

Цель исследования

Целью истинной работы явилось исследование проницаемости интактной и повреждённой кожи для микрочастиц золота и разработка метода усиления их трансдермальной В комплексе с сероорганическими соединениями диффузии в комплексе с сераорганическими соединениями.

^ Задачки исследования

  1. создать продукт микрочастиц золота, содержащий сераорганические соединения диметилсульфоксид и (либо) тиофансульфоксид, для исследования их проницаемости в интактную кожу;

  2. провести сравнительный гистологический анализ проницаемости микрочастиц золота в кожу В комплексе с сероорганическими соединениями при использовании их препаратов с сераорганическими соединениями и под воздействием лазерной микроперфорации и ультразвука;

  3. провести патоморфологическую оценку глубины проницаемости кожи в области искусственно вызванного контактного дерматита для микрочастиц золота в комплексе с сераорганическими В комплексе с сероорганическими соединениями соединениями;

  4. найти сравнительную эффективность проницаемости в кожу препаратов микрочастиц золота с различными сераорганическими соединениями.

^ Научная новизна

В исследовании в первый раз с внедрением способов экспериментальной патоморфологии исследована проницаемость интактной В комплексе с сероорганическими соединениями и повреждённой кожи для наноразмерных частиц золота в комплексе с сераорганическими соединениями диметилсульфоксидом и тиофансульфоксидом. Показана сравнительная эффективность препаратов диметилсульфоксида и тиофансульфоксида для трансдермальной проницаемости наноразмерных частиц золота. Подтверждено, что при местном нанесении раствора микрочастиц В комплексе с сероорганическими соединениями с сераорганическими соединениями не наблюдаются нехорошие эффекты скопления микрочастиц во внутренних органах, нарушения органной и тканевой микроциркуляции, развития в их дистрофических конфигураций. Установлено что, глубина проницаемости повреждённой кожи при В комплексе с сероорганическими соединениями артифициальном хим контактном дерматите для микрочастиц золота в комплексе с сераорганическими соединениями и ультразвуковым воздействием значительно выше, чем проницаемость интактной кожи.

^ Научно-практическая значимость

Разработан необычного состава продукт микрочастиц золота на базе В комплексе с сероорганическими соединениями геля и сераорганического соединения для трансдермального введения в кожу, зарегистрирована заявка на патент РФ № 2012141737 от 01.10.2012. Проведенное исследование позволяет оценивать проницаемость кожи для микрочастиц и их рассредотачивание в органах лабораторных животных при местном нанесении в В комплексе с сероорганическими соединениями комплексе с разными сераорганическими соединениями. Общие методология и разработанные в процессе тестов технические приёмы могут быть применены для разработки фармацевтических форм препаратов микрочастиц для косметологии, исцеления онкологических болезней кожи в медицине и В комплексе с сероорганическими соединениями ветеринарии, более распространённых форм эпидермальных злокачественных новообразований.


^ Главные положения, выносимые на защиту

  1. Внедрение сераорганического соединения диметилсульфоксида обуславливает проницаемость микрочастиц золота в интактную и повреждённую кожу.

  2. Проницаемость для препаратов микрочастиц золота с сераорганическими соединениями В комплексе с сероорганическими соединениями с внедрением ультразвукового воздействия при артифициальном хим контактном дерматите выше, чем для неповреждённой кожи.

^ Апробация результатов исследования

Главные результаты и положения диссертации были представлены, доложены и оговорены на Всероссийской конференции с элементами научной В комплексе с сероорганическими соединениями школы для молодёжи «Инновационные технологии ранешней диагностики и исцеления в мед практике» (Ульяновск, 2011), III Всероссийской научной конференции с интернациональным ролью «Наноонкология—2011» (г. Саратов, 2011), IV международном симпозиуме медицинской и прикладной анатомии (IVth В комплексе с сероорганическими соединениями ISCAA, г. Анкара, Турция) и расширенном межкафедральном совещании кафедр анатомии человека, кафедры морфологии, кафедры онкологии и лучевой диагностики, кафедры биологии и биоэкологии мед факультета им. Т.З. Биктимирова ФГБОУ ВПО «Ульяновский муниципальный В комплексе с сероорганическими соединениями университет» Минобрнауки РФ (Ульяновск, 2012).

Публикации

По теме диссертации размещено 7 научных работ, из их в журнальчиках списка ВАК 5.

^ Объем и структура диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и В комплексе с сероорганическими соединениями способов исследования, результатов собственных исследовательских работ, их обсуждения, выводов, библиографического перечня. Текст диссертации изложен на 124 страничках машинописного текста, иллюстрирован 67 рисунками и 12 таблицами. Перечень использованной литературы содержит 211 работ, из которых 13 российских и 198 зарубежных создателей.

^ МАТЕРИАЛЫ В комплексе с сероорганическими соединениями И Способы ИССЛЕДОВАНИЯ

В работе использовались мужские особи 140 беспородных белоснежных крыс, масса которых в среднем составляла 150-200 гр. Все опыты, уход и содержание осуществлялись в согласовании с Директивой № 63 от 22 сентября 2010 года Президиума и В комплексе с сероорганическими соединениями Парламента Европы «О защите животных применяемых для научных исследований», «Санитарными правилами по устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник от 06.04.1993 и приказом Минздрава РФ № 267 от 19.06.2003 «Об утверждении правил лабораторной практики». На проведение исследовательских работ В комплексе с сероорганическими соединениями было получено разрешение этического комитета ФГБОУ ВПО УлГУ Минобрнауки РФ. Раствор золотых наностержней и нанооболочек был предоставлен лабораторией нанобиотехнологий ИБФР РАН и НИИ естественных наук ФГБОУ ВПО СГУ им. Н В комплексе с сероорганическими соединениями.И. Чернышевского Минобрнауки РФ (г. Саратов).

Общая схема исследования отражена на рис. 1 (с. 8). Все животные были разбиты на 1 контрольную и 3 экспериментальные группы. Контрольной группе животных никаких воздействий не применялось. 1-й экспериментальной группе животных В комплексе с сероорганическими соединениями водные смеси микрочастиц золота вводились внутривенно для определения патоморфологических конфигураций во внутренних органах при их парентеральном внедрении. 2-й экспериментальной группе животных (n=40) применялись воздействия без сераорганических соединений (лазерная микроперфорация, ультрафонофорез В комплексе с сероорганическими соединениями, нанесение на кожу геля с микрочастицами), 3-й экспериментальной группе животных (n=76) применяли препараты с сераорганическими соединениями и ультрафонофорез для воздействия на интактную кожу и при контактном хим дерматите. Контактный хим дерматит был вызван В комплексе с сероорганическими соединениями при помощи однократного местного нанесения 5% раствора 2,4-динитрохлорбензола по методике Залкан П.М. [1965]. Животным 2-й и 3-й экспериментальных групп проводилась оптическая когерентная томография (дальше - ОКТ). Исследования проводились на приборе модели OCP930SR 022 (Thorlabs Inc., USA В комплексе с сероорганическими соединениями) с длиной волны 930 нм. Сканирование каждого участка производилось дважды: 1-ый раз - до воздействий, а 2-ой раз – после воздействия либо элиминации геля.



Рис. 1. Общая схема экспериментального исследования. Примечание – «СОС» – сероорганические соединения.


Гистологические В комплексе с сероорганическими соединениями препараты кожи и органов животных исследовались по стандартным методикам с расцветкой гематоксилином-эозином. Патогистологическому исследованию подверглись мозг, легкие, почки, селезёнка, печень, кожа спины. Для детекции зон кумуляции золотых микрочастиц во внутренних В комплексе с сероорганическими соединениями органах и в коже при местном нанесении смесей использовалось гистохимическое выявление их азотнокислым серебром. Депарафинированные срезы кожи, печени и селезенки доводили до воды. Срезы помещали в 5% раствор азотнокислого серебра на 15 минут в В комплексе с сероорганическими соединениями кипящей водяной бане (12-24 часа при 40). Для удаления осадка серебра срезы переносили в 20% азотную кислоту. Окрашенные срезы промывали водой, обезвоживали, просветляли и заключали. Микрочастицы золота в тканях при всем этом находится в виде темных гранул В комплексе с сероорганическими соединениями. Описание, сравнительно-морфологический анализ и морфометрия структур на неизменных микропрепаратах проводились при помощи бинокулярного микроскопа MoticB3 (Motic, КНР) при повышениях 1040, 10100. Эталоны кожи животных 2-й экспериментальной группы дополнительно исследовались способом В комплексе с сероорганическими соединениями атомной абсорбционной спектрофотомерии на содержание золота, а гистологические препараты кожи животных 3-й группы – при помощи цифровой оптической морфометрии исследовались для измерения тканевой глубины проникания микрочастиц. Длительность аппликации разработанного продукта микрочастиц на интактную кожу во всех В комплексе с сероорганическими соединениями случаях составляла 2 часа. В случаях аппликации продукта на за ранее перфорированную лазером либо поражённую дерматитом кожу длительность воздействия составляла 15 минут. В качестве способа увеличения проницаемости кожи животных 2-й экспериментальной В комплексе с сероорганическими соединениями группы использовалась лазерная микроперфорация. Источником излучения служил эрбиевый лазер PalomarLux 2940 (Palomar Medical Products Ltd., USA) со последующими параметрами излучения: длина волны 2940 нм, энергия импульса 0,5-3 Дж. Импульсы имели трёхпиковую структуру. Для увеличения проникания микрочастиц в ткани В комплексе с сероорганическими соединениями употреблялся ультрафонофорез (излучатель типа Dynatronics, Germany). Участки кожи крысы после нанесения продукта подвергались ультразвуковому воздействию с частотой 1 МГц, мощностью 1,1 Вт и продолжительностью 2 минутки. Статистическая обработка результатов исследовательских работ осуществлялась с В комплексе с сероорганическими соединениями помощью стандартных опций лицензионной программки «Statistica 6.0» компании Statsoft Inc. (США).


^ РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Черта патоморфологических конфигураций во внутренних органах при внутривенном внедрении смесей микрочастиц золота


Для выявления патоморфологических конфигураций во внутренних В комплексе с сероорганическими соединениями органах экспериментальных животных под воздействием препаратов микрочастиц золота использовали метод их внутривенного введения. В согласовании с «Руководством по экспериментальному (доклиническому) исследованию новых фармакологических веществ» [2005] очень допустимое внутривенное введение воды белоснежным нелинейным В комплексе с сероорганическими соединениями крысам составляет 2,0 мл/кг. Животным, разделённым на 3 группы, по 6 крыс в каждой, вводились смеси золотых нанооболочек и наностержней с концентрацией частиц 50 мкг/мл, в объёмах 1 мл/кг и 2 мл/кг массы животного. Контрольной В комплексе с сероорганическими соединениями группе вводили физиологический раствор в подобных объемах. При всем этом формировались 2 контрольные подгруппы по 3 крысы в каждой. Первой подгруппе вводился 1 мл физиологического раствора на килограмм массы, 2-ой – 2 мл. В течение первого денька, после В комплексе с сероорганическими соединениями введения исследуемых смесей, животные находились в лаборатории под непрерывным наблюдением. Наблюдение велось в течение 14 суток. Наибольшая доза введения золотых микрочастиц составила 100 мкг/кг. Смертельных исходов не зафиксировано. Важных различий в состоянии и В комплексе с сероорганическими соединениями поведенческой активности животных контрольной и опытнейших групп также не установлено. Предстоящее повышение дозы лимитировалось максимально вероятным объемом внутривенного введения раствора этому виду экспериментальных животных. Как следует, достигнуть смертельных концентраций смесей золотых В комплексе с сероорганическими соединениями микрочастиц согласно приобретенным нами данным не представляется вероятным. Повышение объёмов смесей до 2 мл на особь, что составляет 6 мл/кг массы тела, также не приводило к токсическим эффектам, исследуемая доза при всем этом В комплексе с сероорганическими соединениями увеличивается до 300 мкг/кг.

На вскрытии животных, выведенных из опыта на 15 день наблюдения после введения смесей золотых микрочастиц, нами были выявлены макроскопические конфигурации в печени и лёгких. В группе крыс, получавших наностержни В комплексе с сероорганическими соединениями у 3-х из 6 животных ткань печени неоднородной расцветки, с подчеркнутым рисунком, зернистая, с завышенным кровенаполнением. В группе крыс, после введения раствора нанооболочек выявлены макроскопические конфигурации в печени и селезенке. Печень полнокровная, на поверхности капсулы В комплексе с сероорганическими соединениями отмечены множественные очаги мерклого сероватого цвета с желтым цветом. В почках части животных, которым вводился раствор золотых нанооболочек, наблюдалось некое утолщение коркового слоя. В легких только 1-го животного наблюдались В комплексе с сероорганическими соединениями множественные крупноочаговые кровоизлияния.

Микроскопичные патоморфологические конфигурации заключались в полнокровии сосудов и цитолизе отдельных нейроцитов мозга. У 3-х из 6 животных, которым вводился раствор наностержней в объеме 2 мл/кг массы тела на 15 день, отмечался также парацеллюлярный отек В комплексе с сероорганическими соединениями. В печени этих животных наблюдались дискомплексация печеночных балок, отдельные очаги кровоизлияний и лизис ядер гепатоцитов (рис. 2). У значимого количества крыс, после внутривенного введения разных объемов раствора нанооболочек определяется некроз В комплексе с сероорганическими соединениями отдельных гепатоцитов, встречаются клеточки с пикнозом ядра, отмечаются явления кариопикноза, кариорексиса и полнокровия сосудов. При гистологическом исследовании на 15 день опыта в легких 2-ух крыс после введения раствора нанооболочек в объеме 2,0 мл/кг наблюдались разрывы В комплексе с сероорганическими соединениями стен альвеол, также участки с утолщенными межальвеолярными перегородками, в каких сосуды и капилляры были расширены и заполнены плотно расположенными эритроцитами. В почечной ткани этих животных микроскопически определяется гипохромное окрашивание проксимальных извитых канальцев В комплексе с сероорганическими соединениями и коллабирование почечных клубочков (рис. 3).



Рис. 2. Микрофото печени крысы на 15 день после введения раствора наностержней. Расцветка гематоксилином и эозином, ув. ×100.




Рис. 3. Микрофото почки крысы на 15 день после введения раствора нанооболочек в объеме 2,0 мл В комплексе с сероорганическими соединениями/кг. Расцветка гематоксилином и эозином, ув. х100.


Проницаемость интактной кожи для препаратов микрочастиц золота с внедрением сераорганических соединений диметилсульфоксида и тиофансульфоксида


Для исследования проницаемости интактной кожи на за ранее депилированный В комплексе с сероорганическими соединениями участок кожи спины экспериментального животного наносили продукт, содержащий микрочастицы золота в комплексе с сераорганическими соединениями. В базу состава разработанного продукта входили концентрированный раствор глицерина и полиэтиленгликоля в определённом соотношении. К базе продукта добавляли по каплям В комплексе с сероорганическими соединениями концентрированный аква раствор нанооболочек либо наностержней. После чего к приобретенному раствору микрочастиц добавляли раствор сераорганического соединения в определённом соотношении. Приобретенный продукт подвергался гомогенизации с внедрением лабораторного шейкера и представлял В комплексе с сероорганическими соединениями собой коллоидный раствор микрочастиц золота, содержащий или диметилсульфоксид, или тиофансульфоксид.

По результатам ОКТ-томографии (рис. 4 и рис. 5) микрочастицы золота содействуют усилению контрастности тканевых слоёв кожи при использовании их продукта, содержащего диметилсульфоксид. Такая контрастность В комплексе с сероорганическими соединениями, согласно приобретенным результатам, отсутствовала на ОКТ-томограммах участков кожи экспериментальных животных, которым применялось воздействие препаратов содержащих тиофансульфоксид. Гистологические находки подтвердили более глубочайшее проникновение микрочастиц золота при исполь-



Рис. 4. ОКТ-томограмма участка кожи крысы В комплексе с сероорганическими соединениями экспериментальной подгруппы 3/8 с местным нанесением продукта микрочастиц золота с диметилсульфоксидом.



Рис. 5. ОКТ-томограмма участка кожи крысы экспериментальной подгруппы 3/7 с местным нанесением продукта микрочастиц золота с тиофансульфоксидом.





Рис. 6. Микрофото участка кожи В комплексе с сероорганическими соединениями крысы экспериментальной группы 3/8, с местным нанесением продукта микрочастиц золота с диметилсульфоксидом. Расцветка азотнокислым серебром по Hacker G.W. с докраской толуидиновым голубым, ув. ×400. 1- скопления микрочастиц золота на поверхности эпидермиса, 2 – скопления микрочастицы золота в В комплексе с сероорганическими соединениями сетчатом слое дермы.


зовании диметилсульфоксида. Продукт, содержащий диметилсульфоксид обуславливает проникновение микрочастиц до сетчатого слоя дермы (рис. 6).



Рис. 7. Микрофото участка кожи крысы экспериментальной группы 3/7, с местным нанесением продукта микрочастиц золота с тиофансульфоксидом. Расцветка азотнокислым серебром В комплексе с сероорганическими соединениями по Hacker G.W. с докраской толуидиновым голубым, ув. ×1000. 1- скопления микрочастиц золота на поверхности эпидермиса, 2 – скопления микрочастиц золота во внутреннем эпителиальном влагалище волоса.


При местном нанесении продукта микрочастиц золота, содержащего тиофансульфоксид, нами В комплексе с сероорганическими соединениями не было установлено проникания их в подэпидермальные слои кожи (рис. 5). Большей частью микрочастицы обнаруживались на поверхности эпидермиса, как остатки нанесённого продукта. Не считая того, наблюдалось их существенное количество на поверхности кутикулы и В комплексе с сероорганическими соединениями внутреннем эпителиальном влагалище волос, в области воронок волосяных фолликулов (рис. 7). Таким макаром, разработанный состав продукта микрочастиц золота в комплексе с диметилсульфоксидом при нанесении на интактную кожу обуславливает их проницаемость В комплексе с сероорганическими соединениями микрочастиц до сетчатого слоя дермы, что подтверждается плодами оптической когерентной томографии и гистохимического исследования препаратов кожи. Для состава с тиофансульфоксидом подобные эффекты не обнаружены.

^ Патоморфологическая оценка конфигураций кожи при лазерной микроперфорации с нанесением препаратов микрочастиц В комплексе с сероорганическими соединениями золота без сераорганических соединений


В итоге проведённых исследовательских работ было установлено, что подготовительная лазерная микроперфорация вместе с ультразвуковым воздействием обеспечивает проницаемость микрочастиц золота в глубочайшие слои кожи, но в отличие от нанесения В комплексе с сероорганическими соединениями препаратов с сероорганическими соединениями без использования таких воздействий вызывает выраженную воспалительную реакцию, приводит к разрушению поверхностных и глубочайших тканевых структурных частей кожи.

Как видно на рис. 8, эпителий кожи этой группы В комплексе с сероорганическими соединениями животных повреждён, встречаются участки некроза эпителия. Коллагеновые волокна глубочайшего слоя дермы сохраняют упорядоченную структуру, волокна сосочкового слоя деструктивно изменены.



Рис. 8. Микрофото кожи крысы экспериментальной группы 2/3 с подготовительной лазерной микроперфорацией, нанесением продукта микрочастиц золота без сераорганических В комплексе с сероорганическими соединениями соединений и воздействием ультразвука. Расцветка гематоксилином и эозином, ув. х100.


Физические воздействия на кожу в качестве фактора усиливающего её проницаемость для микрочастиц различного размера, могут приводить к разрушению как поверхностных (отдельные В комплексе с сероорганическими соединениями слои эпидермиса), так и поболее глубочайших структурных частей кожи (коллагеновые волокна сосочкового слоя дермы). Методы нанесения на кожу препаратов микрочастиц золота, содержащих сераорганические либо другие соединения, способные усиливать трансдерамльную проницаемость В комплексе с сероорганическими соединениями показывают огромную перспективность, потому что владеют щадящим эффектом и отсутствием повреждающего воздействия.


Сравнительная оценка проницаемости препаратов микрочастиц золота с сераорганическими соединениями под ультразвуковым воздействием при нанесении на интактную кожу и при контактном В комплексе с сероорганическими соединениями хим дерматите


Наши исследования проявили, что проницаемость кожи экспериментальных животных с вызванным контактным хим дерматитом для микрочастиц золота в комплексе с сераорганическими соединениями и ультразвуковым воздействием может достигать уровня подкожно-жировой клетчатки и В комплексе с сероорганическими соединениями подкожной мускулатуры, чего не отмечается при подобных воздействиях на интактную кожу. Как надо из представленных на рис. 9 и рис. 10 оптических когерентных томограмм, трансдермальная диффузия микрочастиц золота содействует большей контрастности получаемых изображений. Проницаемость интактной кожи при В комплексе с сероорганическими соединениями нанесении продукта микрочастиц с тиофансульфоксидом под воздействием ультразвука обеспечивает малозначительное и



Рис. 9. ОКТ-томограмма участка интактной кожи крысы экспериментальной подгруппы 3/3 при нанесении продукта микрочастиц золота с тиофансульфоксидом под ультразвуковым воздействием.




Рис. 10. ОКТ В комплексе с сероорганическими соединениями-томограмма участка кожи крысы экспериментальной подгруппы 3/6 с контактным дерматитом при нанесении продукта микрочастиц золота с диметилсульфоксидом под ультразвуковым воздействием.

неглубокое их проникновение в поверхностные слои кожи (рис. 9). В то В комплексе с сероорганическими соединениями же время при использовании продукта микрочастиц с диметилсульфоксидом и нанесении его под воздействием ультразвука на кожу с химически вызванным контактным дерматитом выявлено глубочайшее их проникновение, прямо до подкожно-жировой клетчатки и подкожной В комплексе с сероорганическими соединениями мускулатуры (рис. 10, 11).



Рис. 11. Микрофото участка подкожно-жировой клетчатки и мускулатуры крысы экспериментальной группы 3/6 с контактным дерматитом, при нанесении продукта микрочастиц золота с диметилсульфоксидом под ультразвуковым воздействием. Расцветка азотнокислым серебром по Hacker G.W., ув В комплексе с сероорганическими соединениями. ×600. 1 – скопления микрочастиц золота, окружающих мышечные волокна.

Таким макаром, общая оценка результатов по исследованию сравнительной эффективности усиления трасндермальной проницаемости сераорганическими соединениями микрочастиц золота под ультразвуковым воздействием указывает, что поражённая хим контактным дерматитом кожа лучше В комплексе с сероорганическими соединениями проницаема, ежели, чем интактная. Это противоречит данным [Baroli et al., 2007; Samberg et al., 2010], продемонстрировавшим худшую проницаемость поражённой кожи по сопоставлению с интактной. Может быть, фактором, обусловившим такие различия в нашем исследовании В комплексе с сероорганическими соединениями, является дополнительное ультразвуковое воздействие. Природа сераорганического соединения также имеет существенное значение для усиления трасндермальной проницаемости микрочастиц. Микроморфометрия глубины проникания микрочастиц золота при использовании препаратов разработанного состава, представленная в табл. 1, обосновывает, что диметилсульфоксид обладает В комплексе с сероорганическими соединениями более высочайшими проводящими качествами по сопоставлению с тиофансульфоксидом, как через интактную, так и поражённую дерматитом кожу.

Таблица 1

Глубина проникания в кожу препаратов микрочастиц золота с разными сераорганическими соединениями под В комплексе с сероорганическими соединениями воздействием ультразвука (M±σ, мкм)


Состояние кожи

Диметилсульфоксид

Тиофансульфоксид

Интактная кожа

30,8±4,6* (n=10)

-

Контакный дерматит

1240±235* (n=10)

721,5±128* (n=10)

Примечание: * - статистически важные различия (p<0,0004)


ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В медицине и ветеринарии накожная аппликация довольно издавна употребляется как один из методов местной доставки фармацевтических препаратов, а В комплексе с сероорганическими соединениями с возникновением отлично исследованных путей трансдермальной диффузии веществ, кожа стала обширно употребляться и в качестве органа для их системной доставки в организм. Обычно, перспектива даже опосредованной микрочастицами доставки препаратов В комплексе с сероорганическими соединениями в эпидермис и дерму без нарушения их органной целостности обладает маленьким фуррором. Анализ специальной научной литературы, посвящённой этой дилемме, указывает, что утверждение о том, что микрочастицы больше 20 нм в поперечнике, не попадают в жизнестойкие В комплексе с сероорганическими соединениями ткани кожи, является спорным [Pardeike, Hommoss, Muller, 2009]. Нарушения целостности эпидермального барьера в интактной либо поражённой коже разносторонне содействуют проницаемости частиц.

В итоге проведённого нами исследования подтверждено, что значимым модулирующим эффектом на трансдермальную В комплексе с сероорганическими соединениями проницаемость золотых нанооболочек размером 120 нм и наностержней размером 50 нм поперечником и их внутрикожный транспорт обладает ряд физических и хим воздействий. Независимо от состояния органа (интактная либо поражённая кожа) существенное усиление В комплексе с сероорганическими соединениями трансдермальной диффузии микрочастиц, без дополнительного повреждающего воздействия может быть достигнуто при помощи использования сераорганических соединений, и, а именно, диметилсульфоксида под воздействием ультразвука. Приобретенные результаты позволяют считать данное направление исследовательских работ более многообещающим в поиске путей В комплексе с сероорганическими соединениями улучшения трансдермального транспорта как функционализированных так и не функционализированных микрочастиц золота для терапевтических целей, также наносителей лекарственных препаратов и на биологическом уровне активных соединений.


ВЫВОДЫ

  1. Разработанный состав продукта микрочастиц золота в комплексе с В комплексе с сероорганическими соединениями димексидом при нанесении на интактную кожу обуславливает проницаемость микрочастиц до сетчатого слоя дермы, подобные эффекты для состава с тиофансульфоксидом не обнаружены.

  2. Обеспечение проницаемости кожи для микрочастиц золота при помощи лазерной микроперфорации вместе В комплексе с сероорганическими соединениями с ультразвуковым воздействием в отличие от использования препаратов с сераорганическими соединениями вызывает воспалительную реакцию, приводит к разрушению поверхностных и глубочайших тканевых структурных частей кожи.

  3. Глубина проницаемости кожи в области искусственно вызванного В комплексе с сероорганическими соединениями контактного дерматита для микрочастиц золота в комплексе с сераорганическими соединениями и ультразвуковым воздействием (1240±235 мкм) значительно выше, чем глубина проницаемость интактной кожи с подобными воздействиями (30,8±4,6 мкм) и находится на уровне подкожно-жировой клетчатки и В комплексе с сероорганическими соединениями подкожной мускулатуры.

  4. При использовании состава продукта, включающего диметилсульфоксид глубина проницаемости кожи в области искусственно вызванного контактного дерматита для микрочастиц золота при ультразвуковом воздействием значительно выше, чем при использовании тиофансульфоксида.


^ ПРАКТИЧЕСКИЕ В комплексе с сероорганическими соединениями Советы

Разработан уникальный состав продукта микрочастиц золота на базе геля и сераорганического соединения для трансдермального введения в кожу (заявка на патент РФ № 2012141737 от 01.10.2012). Результаты исследования позволяют проводить оценку проницаемости кожи для наноразмерных материалов и В комплексе с сероорганическими соединениями их рассредотачивание во внутренних органах лабораторных животных при местном нанесении в комплексе с разными сераорганическими соединениями. Общие методология и разработанные в процессе тестов технические приёмы могут быть применены для разработки фармацевтических форм В комплексе с сероорганическими соединениями препаратов микрочастиц для косметологии, исцеления онкологических болезней кожи в медицине и ветеринарии, более распространённых форм эпидермальных злокачественных новообразований.


^ Перечень РАБОТ, Размещенных ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ


Публикации в журнальчиках из списка ВАК

1. Рыжова М.В В комплексе с сероорганическими соединениями. Исследование возможной токсичности золотых микрочастиц при парентеральном внедрении/ Н.А. Цыганова, М.В. Рыжова, Р.М. Хайруллин и др.// Русский биотерапевтический журнальчик.- 2010.- Том 9.- № 3.- С. 26–27.

2. Рыжова М.В. Кинетика различных типов золотых В комплексе с сероорганическими соединениями микрочастиц при парентеральном внедрении и морфологические конфигурации внутренних органов/ Г.С. Терентюк, Б.Н. Хлебцов, Л.А. Дыкман, Д.Е. Суетенков, Н.А. Цыганова, Н.А. Рыжова и др.// Морфологические ведомости.- 2011.- № 3.- C. 77-82.

3. Рыжова В комплексе с сероорганическими соединениями М.В. Проницаемость гемато-плацентарного барьера белоснежных крыс для золотых микрочастиц/ Н.А. Цыганова, М.В. Рыжова, Р.В. Никифоров и др.// Русский биотерапевтический журнальчик.- 2011.- Том 10.- № 4.- С. 113.

4. Рыжова М.В В комплексе с сероорганическими соединениями. Способы контроля тканевой динамики микрочастиц в опухолевых тканях при лазерной гипертермии/ Н.А. Цыганова, М.В. Рыжова, Г.С. Терентюк и др.// Русский биотерапевтический журнальчик.- 2011.- Том 10.- № 1.- C. 66.

5. Рыжова М.В. Внедрение фракционной В комплексе с сероорганическими соединениями лазерной микроабляции и ультразвука для улучшения доставки микрочастиц золота в кожу invivo/ Г.С. Терентюк, Э.А. Генина, А.Н. Башкатов, М.В. Рыжова и др.// Квантовая электроника.– 2012.– Том 42.- № 6.– С. 471-477.

Публикации в повторяющихся изданиях, сборниках В комплексе с сероорганическими соединениями и материалах конференций

6. Рыжова М.В. О тканевых эффектах экспериментального использования микрочастиц золота при управляемом воздействии лазером / М.В. Рыжова, Г.С. Терентюк, Р.М. Хайруллин// В кн.: Инноваторские технологии ранешней диагностики В комплексе с сероорганическими соединениями и исцеления в мед практике.- Матер. Всеросс. конф. с элемент. научн. шк. для молодёжи.- Ульяновск: УлГУ, 2011.- С. 282 – 284.

7. Savenkova M. V. Morphological study of the permeability the skin and placenta В комплексе с сероорганическими соединениями of the rat for the gold nanoparticles/ R. Khayrullin, G. Terentyuk, M. Savenkova, R. Nikiforov, N. Tsyganova// Anatomy (International Journal of Experimental and Clinical Anatomy).- 2012.- Vol. 6.- Suppl.- P-144. - S. 84.




v-kakom-meste-hromosomi-raspolagayutsya-centromera.html
v-kakom-napravlenii-slivaetsya-voda-v-vanne.html
v-kakom-obeme-vozmeshaetsya-vred-prichinennij-okruzhayushej-srede.html